在本研究中，研究人员检查了呼吸道病毒感染对小鼠乳腺癌休眠的影响。首先，他们使用小鼠乳腺癌播散性癌细胞休眠模型 MMTV-Her2，来探索甲型流感病毒（IAV）对休眠播散性癌细胞唤醒的影响。小鼠被感染了亚致死剂量的甲型流感病毒；MMTV-Her2 小鼠和野生型小鼠都表现出相当的炎症反应和病毒清除动力学。

研究人员在多个时间点采集了肺部组织，并评估了人表皮生长因子受体2阳性（HER2+）细胞的数量。感染前，检测到少量孤立的播散性癌细胞或播散性癌细胞簇。然而，在感染后第 3 天至第 15 天（dpi），转移负荷增加了高达 1000 倍。HER2+ 细胞的数量在第 28 天和第 60 天时仍然升高，并且在九个月后仍可检测到。

乳腺中 Ki67+HER2+ 细胞没有变化，血液样本的 qPCR 检测显示循环癌细胞没有增加，这表明肺部 HER2+ 细胞的增加并非源于乳腺中癌细胞播种的增加。

此外，研究小组观察到在感染后第 3 天（3 dpi），表达 Ki67 的 HER2+ 细胞显著增加。虽然到第15天（15 dpi）时，表达 Ki67 的 HER2+ 细胞有所减少，但与基线相比，这些细胞的数量在第 60 天（60 dpi）时仍然保持升高。

休眠的播散性癌细胞保持间质样状态（波形蛋白阳性，vimentin+），并在退出休眠期间发生上皮转变（上皮细胞粘附分子阳性 EpCAM+EpCAM+）。未感染肺部中的大多数休眠播散性癌细胞是 vimentin+。虽然在感染早期（3 至 6 dpi）vimentin+ HER2+ 细胞的百分比未受影响，但到第 9 天（9 dpi）时下降至 50%，到第 28 天（28 dpi）时降至 20% 以下。相反，一部分 HER2+ 细胞在第 3 天（3 dpi）时显示出 EpCAM 表达。

此外，虽然大多数 HER2+ 细胞在 6 dpi 后失去了 EpCAM 阳性，但 EpCAM+ HER+ 细胞的百分比仍然保持升高。因此，甲型流感病毒感染诱导了短暂的上皮转变，产生了一种独特的混合增殖表型，该表型保留了一些间质标记物的表达，从而使休眠播散性癌细胞得以唤醒。

RNA-seq 分析显示炎症（IL-6–JAK–STAT3）、血管生成和细胞外基质重塑通路（包括胶原交联和金属蛋白酶活性）被激活，这些通路已知可支持肿瘤生长。

作者还报告了肿瘤微环境的变化，包括细胞外基质变化和血管生成信号，这些变化可能有助于维持被唤醒的播散性癌细胞。该团队还注意到感染后播散性癌细胞中 IL-6 信号通路的激活。进一步的研究表明，感染触发的 IL-6 是介导初始休眠播散性癌细胞唤醒的关键。

研究人员确定了一个两阶段过程：首先，IL-6 驱动从间质表型向混合表型的转变，并推动快速扩增；随后，在 T细胞募集后，CD4+ T细胞维持被唤醒的 DCC 群体。在这个第二阶段，CD4+ 细胞部分通过抑制 CD8+ 免疫反应来维持播散性癌细胞。

基因表达谱分析显示，荷瘤小鼠中的 CD4+ 细胞线粒体含量减少，偏向记忆表型，且效应功能降低，进一步限制了 CD8+ 细胞的细胞毒性。

研究还发现，清除 CD4+ 细胞可以恢复 CD8+ 细胞的线粒体含量和效应活性，从而更有效地清除播散性癌细胞。

接下来，该团队调查了 COVID-19 是否能唤醒休眠的播散性癌细胞。为此，他们使用了一种小鼠适应的 SARS-CoV-2 毒株（MA10）。MA10 感染引发了肺部 IFNα 和 IL-6 的产生。

此外，MA10 感染导致到第 28 天（28 dpi）时 HER2+ 细胞显著增加。而且，MA10感染后，HER2+ 细胞和 Ki67+HER2+ 细胞的数量逐步增加，同时波形蛋白阳性率下降，EpCAM 阳性率短暂增加。一致地，这些变化需要 IL-6，因为在 IL-6 基因敲除小鼠中，与 MA10 感染相关的变化显著减少。

此外，研究人员分析了英国生物银行（UKB）的数据，以评估 SARS-CoV-2 检测阳性是否与癌症幸存者更高的死亡风险相关。在一个随访至 2022 年 12 月的 UKB 人群中，包括 4,837 名在 2015 年前诊断出癌症的个体，共记录了 413 例死亡。其中，SARS-CoV-2 检测阳性和阴性者分别有 115 例和 298 例死亡，得出的比值比（OR）为 4.5。

即使排除了 COVID-19 导致的死亡，检测阳性者的死亡率仍然更高，OR 为 2.56。与检测阴性参与者相比，检测阳性者的癌症死亡率增加了近两倍（OR: 1.85）。

数据显示，这种关联在感染后的最初几个月最强，并随着时间的推移而减弱，这反映了小鼠模型中观察到的播散性癌细胞早期快速扩增的情况。研究团队观察到，与检测阴性者相比，SARS-CoV-2 检测阳性的参与者在全因死亡率、非 COVID-19 死亡率和癌症死亡率方面的风险均升高。

最后，研究使用 Flatiron 健康数据库评估了患有乳腺癌的女性在感染 COVID-19 后是否经历更高的肺转移进展风险。在乳腺癌诊断后感染 COVID-19 的女性，后续诊断为转移性乳腺癌的风险比（HR）为 1.44（经年龄、种族和民族调整）。在进一步对乳腺癌亚型和合并症进行调整后，风险比为 1.41，不再具有统计学显著性，尽管效应方向是一致的。

结果表明，呼吸道病毒感染促进休眠癌细胞的唤醒和扩增。一个 IL-6 依赖的从间质状态向混合表型的转变促进了扩增，随后建立了抑制播散性癌细胞清除的 CD4+ 生态位。

这些生态位还通过改变免疫细胞代谢和效应潜能来损害 CD8+ 抗肿瘤活性。其他免疫细胞群体，包括巨噬细胞，也显示出向支持肿瘤状态的表型转变。

总体而言，这些数据揭示了肺部病毒感染如何增加癌症复发风险，小鼠和人类数据均显示感染后早期风险最大，这强调了需要制定策略来减轻相关的转移进展风险增加。

• 研究发现血栓中存在微塑料，与心脏病和中风风险增加有关